INTRODUCTION
1. Le plan d'échantillonnage nécessite un échantillon de laboratoire de 20 kg d'arachides décortiquées qui sera prélevé sur un lot d'arachides (correspondant à 27 kg d'arachides non décortiquées) et testé pour déterminer la concentration en aflatoxines totales qui ne devra pas dépasser 15 parties par milliard (ppM).
2. Ce plan d'échantillonnage a été conçu à des fins d'application et de contrôle concernant les aflatoxines totales dans les livraisons d'arachides en vrac sur le marché de l'exportation. Pour aider les pays membres à appliquer le plan d'échantillonnage du Codex, on décrit ci-après des méthodes de collecte et de préparation des échantillons, ainsi que des méthodes d'analyse qui seront utilisées pour quantifier les aflatoxines présentes dans les lots d'arachides en vrac.
A. DEFINITIONS
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Lot: |
quantité identifiable d'un produit alimentaire livré en
une seule fois et qui, de l'avis de l'agent d'échantillonnage,
présente des caractères communs, tels que l'origine, la
variété, le type d'emballage, l'emballeur, l'établissement
d'emballage ou les marques. |
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Sous-lot: |
partie déterminée d'un gros lot sur laquelle sera appliquée
la méthode d'échantillonnage. Chaque sous-lot doit être
physiquement séparé et identifiable. |
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Plan d'échantillonnage: |
il est défini par une procédure d'essai d'aflatoxines et
une limite d'acceptation/rejet. Cette procédure comprend trois
étapes: collecte de l'échantillon, préparation de
l'échantillon et quantification des aflatoxines. La limite d'acceptation/rejet
est un seuil de tolérance habituellement égal à la
limite maximale Codex. |
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Echantillon supplémentaire: |
quantité de matériel prélevé en n'importe
quel point du lot ou du sous-lot. |
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Echantillon global: |
total de tous les échantillons supplémentaires provenant
du lot ou du sous-lot. L'échantillon global doit être au
moins aussi gros que l'échantillon de laboratoire de 20 kg. |
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Echantillon de laboratoire: |
la plus petite quantité d'arachides pulvérisées
dans un broyeur. L'échantillon de laboratoire peut être une
partie de l'échantillon global entier. Si l'échantillon
global dépasse 20 kg, un échantillon de laboratoire de 20
kg doit être prélevé au hasard sur l'échantillon
global. L'échantillon doit être moulu finement et mélangé
minutieusement en utilisant un processus proche d'une homogénéisation
aussi complète que possible. |
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Prise d'essai: |
partie de l'échantillon de laboratoire pulvérisé.
L'échantillon de laboratoire entier de 20 kg doit être pulvérisé
dans un broyeur. Une partie de cet échantillon est prélevée
d'une manière aléatoire pour l'extraction de l'aflatoxine
aux fins de l'analyse chimique. Selon la capacité du broyeur, l'échantillon
global de 20 kg peut être divisé en plusieurs échantillons
de même taille, si tous les résultats atteignent la moyenne. |
Produit à échantillonner
3. Chaque lot à examiner doit être échantillonné séparément. Les gros lots devraient être subdivisés en sous-lots à échantillonner séparément. La subdivision peut être faite suivant les spécifications figurant au Tableau 1 ci-après.
4. Compte tenu que le poids du lot n'est pas toujours un multiple exact du poids des sous-lots, le poids du sous-lot peut dépasser le poids mentionné de 20 pour cent au maximum.
Tableau 1: Subdivision des gros lots en sous-lots pour l'échantillonnage
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Produit |
Poids du lot - tonne (t) |
Sous-lots (poids ou nombre) |
Nombre d'échantillons supplémentaires |
Poids de l'échantillon de laboratoire(kg) |
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Arachides |
³ 500 |
100 tonnes |
100 |
20 |
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>100 et <500 |
5 sous-lots |
100 |
20 |
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³ 25 et £ 100 |
25 tonnes |
100 |
20 |
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>15 et <= 25 |
- 1 sous-lot |
100 |
20 |
5. Le nombre d'échantillons supplémentaires à prélever dépend du poids du lot, le minimum étant 10 et le maximum 100. Les chiffres du Tableau 2 peuvent être utilisés pour déterminer le nombre d'échantillons supplémentaires. Il est nécessaire que le poids total de l'échantillon soit de 20 kg.
Tableau 2: Nombre d'échantillons supplémentaires à prélever selon le poids du lot
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Poids du lot en tonnes - (t) |
Nombre d'échantillons supplémentaires |
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T £ 1 |
10 |
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1 <T £ 5 |
40 |
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5 < T £ 10 |
60 |
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10 < T < 15 |
80 |
6. Les procédures suivies pour collecter des échantillons supplémentaires dans un lot d'arachides sont extrêmement importantes. Chaque arachide contenue dans le lot devrait avoir les mêmes possibilités d'être choisie. Les méthodes suivies pour la collecte des échantillons entraîneront des biais si l'équipement et les procédures utilisés pour collecter les échantillons supplémentaires suppriment ou réduisent les possibilités pour chaque arachide du lot d'être choisie.
7. Etant donné qu'il n'y a pas moyen de savoir si les graines d'arachide contaminées sont uniformément réparties dans le lot, il est essentiel que l'échantillon global soit constitué de nombreuses petites parties ou d'un grand nombre de fragments du produit prélevés en différents points du lot. Si l'échantillon global est plus gros qu'on ne le souhaitait, il faut le mélanger et le subdiviser jusqu'à l'obtention d'un échantillon de la taille requise.
Lots statiques
8. On entend par lot statique une grande masse d'arachides contenue soit dans un seul grand conteneur comme un wagon ou un camion, ou dans de nombreux petits conteneurs tels que sacs ou boîtes, les arachides étant statiques au moment où l'échantillon est collecté. Collecter un échantillon véritablement aléatoire dans un lot statique peut être difficile car il est parfois impossible d'avoir accès à toutes les arachides dans certains conteneurs.
9. Prélever un échantillon global dans un lot statique exige habituellement l'emploi de sondes pour collecter le produit dans le lot. Les sondes utilisées devraient être conçues en fonction du type de conteneur. La sonde 1) devrait être assez longue pour atteindre tout le produit, 2) ne devrait exclure aucun élément du lot de la collecte, et 3) ne devrait pas altérer les éléments du lot. Comme mentionné ci-dessus, l'échantillon global devrait être un mélange de nombreux petits fragments de produit pris en différents points du lot.
10. Pour les lots commercialisés sous emballages individuels, la fréquence d'échantillonnage (SF), ou le nombre de paquets dans lesquels les échantillons supplémentaires sont prélevés, est fonction du poids du lot (LT), du poids de l'échantillon supplémentaire (IS), du poids de l'échantillon global (AS) et du poids d'un paquet individuel (IP), comme suit:
Equation 1: SF = (LT × IS)/(AS × IP). La fréquence d'échantillonnage (SF) est le nombre de paquets échantillonnés. Tous les poids doivent être exprimés dans les mêmes unités de masse, par exemple en kilogrammes.
Lots mobiles
11. Pour obtenir un échantillonnage véritablement aléatoire, il faut prendre un échantillon global dans un flux continu d'arachides lorsque le lot est transféré, par exemple, par une courroie transporteuse d'un endroit à un autre. Lorsqu'on prélève des échantillons dans un flux, il faut prendre de petits fragments de produit sur toute la longueur du flux et mélanger les arachides pour obtenir un échantillon global; si l'échantillon global est plus gros que l'échantillon requis au laboratoire, il faut mélanger et subdiviser cet échantillon pour obtenir l'échantillon de laboratoire de la taille requise.
12. Des dispositifs d'échantillonnage automatique sont vendus dans le commerce, dotés de compte-minutes, qui effectuent automatiquement des prélèvements dans le flux à intervalles préétablis et réguliers. Quand on ne dispose pas d'équipement automatique, on peut charger quelqu'un de passer manuellement une palette dans le flux à intervalles réguliers pour collecter des échantillons supplémentaires. Que l'on utilise des méthodes automatiques ou des méthodes manuelles, de petits fragments d'arachide doivent être recueillis et mélangés à intervalles fréquents et réguliers dans tout le flux d'arachides après le point d'échantillonnage.
13. Le dispositif d'échantillonnage doit être installé de la manière suivante: 1) le plan de l'ouverture du dispositif doit être perpendiculaire à la direction du flux, 2) le dispositif doit passer à travers toute la section du flux; et 3) l'ouverture devrait être assez large pour pouvoir collecter tous les éléments intéressants du lot. En règle générale, la largeur de l'ouverture du dispositif doit être d'environ trois fois les dimensions les plus larges des éléments du lot.
14. La taille de l'échantillon global (S) en kg, prélevé dans un lot par un dispositif d'échantillonnage est la suivante:
Equation 2: S = (D × LT)/(T × V). D est la largeur de l'ouverture du dispositif (en cm), LT est le poids du lot (en kg), T est l'intervalle ou le temps qui s'écoule entre les prélèvements dans le flux (en secondes) et V est la vitesse (en cm/sec) du dispositif.
15. Si le débit massique du flux, MR (kg/sec), est connu, la fréquence d'échantillonnage (SF), ou le nombre de prélèvements effectués par le dispositif d'échantillonnage, est:
Equation 3: SF = (S × V)/(D × MR).
16. On peut aussi utiliser l'équation 2 pour calculer d'autres éléments intéressants, tels que le temps qui s'écoule entre les prélèvements (T). Par exemple, le temps requis (T) entre les prélèvements pour obtenir un échantillon global de 20 kg sur un lot de 30 000 kg, si la largeur de l'ouverture du dispositif est de 5,08 cm et la vitesse du dispositif dans le flux de 30 cm/sec. Calcul de T dans l'équation 2:
T = (5,08 cm × 30 000 kg)/(20 kg × 30 cm/sec) = 254 sec
17. Si le lot se déplace à raison de 500 kg par minute, le lot entier passera à travers le dispositif en 60 minutes et seulement 14 prélèvements (14 échantillons supplémentaires) seront effectués dans le lot. Cela pourrait ne pas suffire, en ce sens que trop de produit passe à travers le dispositif entre chaque prélèvement.
Poids de l'échantillon supplémentaire
18. Le poids de l'échantillon supplémentaire devrait être d'environ 200 grammes ou plus suivant le nombre d'échantillons supplémentaires nécessaires pour obtenir un échantillon global de 20 kg.
Emballage et envoi d'échantillons
19. Chaque échantillon de laboratoire devra être placé dans un récipient propre et inerte offrant une protection adéquate contre la contamination externe et contre tout dommage que pourrait subir l'échantillon pendant le transport. Toutes les précautions nécessaires devront être prises pour éviter tout changement dans la composition de l'échantillon de laboratoire qui pourrait survenir durant le transport ou l'entreposage.
Fermeture et étiquetage des échantillons
20. Chaque échantillon de laboratoire prélevé pour un usage officiel devra être hermétiquement fermé sur le lieu de l'échantillonnage et identifié. Il faudra enregistrer chaque échantillon afin que chaque lot puisse être identifié sans ambiguïté, indiquer la date et le lieu de l'échantillonnage et fournir toute information supplémentaire qui pourrait être utile à l'analyste.
C. Préparation de l'échantillon
Précautions
21. Durant la procédure, il faudrait éviter autant que possible la lumière du jour, étant donné que l'aflatoxine se décompose progressivement sous l'effet de la lumière ultraviolette.
Homogénéisation - Broyage
22. Les aflatoxines étant réparties de manière non homogène, les échantillons doivent être préparés, et en particulier homogénéisés avec un très grand soin. Tout échantillon de laboratoire obtenu à partir d'un échantillon collectif doit être utilisé pour l'homogénéisation et le broyage de l'échantillon.
23. L'échantillon doit être finement broyé et mélangé avec soin, à l'aide d'une méthode permettant d'obtenir un produit le plus homogène possible.
24. L'utilisation d'un broyeur à marteau doté d'un tamis de #14 (trou de 3,1 mm de diamètre dans le tamis) représente un compromis sur les plans du coût et de la précision. Si l'on utilise un équipement plus sophistiqué donnant un produit plus fin, on obtiendra une variance d'échantillonnage plus réduite.
Prise d'essai
25. La taille recommandée de la prise d'essai est de 100 g minimum obtenue de l'échantillon de laboratoire.
D. Méthodes d'analyse
Généralités
26. On utilisera des méthodes critères qui comportent une série de critères de performance auxquels la méthode d'analyse utilisée doit être conforme. Ce type d'approche présente l'avantage de ne pas obliger à fournir des détails spécifiques sur la méthode utilisée et permet donc de profiter des progrès de la méthodologie sans avoir à réexaminer ou à modifier la méthode spécifiée. Les critères de performance établis pour les méthodes devraient comprendre tous les paramètres que chaque laboratoire doit respecter tels que le seuil de détection, le coefficient de variation de la répétabilité, le coefficient de variation de la reproductibilité et le taux de récupération nécessaires pour diverses restrictions statutaires. En adoptant cette approche, les laboratoires seraient libres d'utiliser la méthode d'analyse convenant le mieux à leurs installations. Les méthodes d'analyse qui sont acceptées par les chimistes à l'échelon international (par exemple, les méthodes AOAC) peuvent être utilisées. Ces méthodes sont en permanence l'objet d'un suivi et d'une mise à jour en fonction des progrès technologiques.
Critères de performance pour les méthodes d'analyse
Tableau 3: Spécifications auxquelles les méthodes d'analyse doivent satisfaire
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Critère |
Taux de concentration |
Valeur recommandée |
Valeur maximale autorisée |
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Essais à blanc |
Tous |
Négligeable |
- |
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Récupération- aflatoxines totales |
1 - 15 mg/kg |
70 à 110 % |
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> 15 mg/kg |
80 à 110 % |
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Fidélité RSDR |
Tous |
Telle que tirée de l'équation d'Horwitz |
2 × valeur tirée de l'équation d'Horwitz |
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Fidélité RSDr = 0,66 fois fidélité
RSDR à la concentration souhaitée |
|||
RSDR = 2(1-0.5logC)30. Il s'agit là d'une équation de fidélité généralisée qui est indépendante de la substance à analyser et de la matrice et ne dépend que de la concentration pour les méthodes d'analyse les plus répandues.où:
* RSDR est l'écart-type relatif calculé à partir des résultats donnés dans des conditions de reproductibilité [(sR/
) × 100]
* C est le taux de concentration (c'est-à-dire 1 = 100g/100g, 0,001 = 1,000 mg/kg)
